透析只需要使用專用的半透膜即可完成,通常是將半透膜制成袋狀,將生物大分子樣品溶液置入袋內,將
透析袋浸入水或緩沖液中,樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留在袋內,而鹽和小分子物質不斷擴散透析到袋外,直到袋內外兩邊的濃度達到平衡為止。保留在透析袋內未透析出的樣品溶液稱為“保留液”,袋(膜)外的溶液稱為“滲出液”或“透析液”。
透析的動力是擴散壓,擴散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜的厚度,正比于欲透析的小分子溶質在膜內外兩邊的濃度梯度,還正比于膜的面積和溫度,通常是4℃透析,升高溫度可加快透析速度。
新的透析袋如不作特殊處理,則可用沸水煮5-10分鐘,再用蒸餾水洗凈,即可使用。使用時,一端用橡皮筋或線繩扎緊,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,用手指稍加壓,檢查不漏,方可裝入待透析液,通常要留三分之一至一半的空間,以防透析過程中,透析的小分子量較大時,袋外的水和緩沖液過量進入袋內將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質溶液透析過夜時,體積增加50%是正常的。為了加快透析速度,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌。透析的容器要大一些,可以使用大燒杯、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,可在袋內放一截兩頭燒圓的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下。
檢查透析袋的透析效果方法是用1%BaCl2檢查(NH4)2SO4,用1%AgNO3檢查NaCl、KCl等。
為提高透析效率,還可以使用各種透析裝置。使用者也可以自行設計與制作各種簡易的透析裝置。透析裝置由于使用對流透析的原理,使透析速度和效率大大提高。